Oddělení je především zaměřeno na vývoj a přípravu tkáňových náhrad, především biodegradabilních a na bázi nanovláken a pěn, modelování proteinových struktur, ale také vyhledávání možností praktického využití výsledků. Vyvíjíme technologii uvolňování bioaktivních látek s využitím různých typů nanovlákenných nosičů, syntetických nebo nativních růstových faktorů, což umožňuje řízený přísun živin a léků přímo do místa defektu. Kromě toho vyvíjíme také umělé chrupavčité a kostní náhrady pro klinické využití v ortopedii, nanovlákenné nosiče pro hojení kožních defektů a incisionální hernie.
Optimalizace tisknutelnosti a mechanických vlastností biokompozitních směsí poly(3-hydroxybutyrátu) a biologická odezva buněk Saos-2
Studie se zaměřuje na vývoj a optimalizaci materiálů určených pro 3D tisk nosičů pro kostní tkáňové inženýrství. Použité kompozity vycházely z polyhydroxybutyrátu (PHB), který byl doplněn o kyselinu polymléčnou (PLA), hydroxyapatit, plastifikátor a polyvinylalkohol (PVA) (připravený na VUT v Brně, Ústav chemie materiálů). Na 3D tištěných nosičích jsme hodnotili metabolickou aktivitu, proliferaci a osteogenní diferenciaci buněk Saos-2 během 21 dní. Nejlepší buněčnou odpověď vykazovaly směsi s vyšším obsahem hydroxyapatitu a nižším množstvím plastifikátoru, které podporovaly i zvýšenou mineralizaci. Výsledky potvrzují, že optimalizované PHB kompozity mají vysoký potenciál pro aplikace v kostní regeneraci.
3D tištěné nosiče na bázi poly(3-hydroxybutyrátu). Schéma experimentu znázorňuje přípravu různých směsí na bázi poly(3-hydroxybutyrátu) (P3HB) určených k výrobě filamentů pro 3D tisk nosičů pro tkáňové inženýrství kosti (A). Biologická odpověď buněk Saos-2 na vybrané materiály (Mix 9–13) byla hodnocena z hlediska buněčné proliferace (B) a osteogenní diferenciace, stanovené aktivitou alkalické fosfatázy (C). Reprezentativní konfokální snímky buněk rostoucích na nosiči Mix 13 po 14 dnech (nahoře) a 21 dnech kultivace (dole) jsou uvedeny v části (D). Buněčná jádra byla obarvena propidium jodidem (červeně) a buněčné membrány barvivem DiOC6(3) (zeleně). Měřítko: 200 µm.
Publikace:
Štěpán Krobot, Přemysl Menčík, Kateřina Chaloupková, Ján Bočkaj, Sára Vach Agócsová, Michala Klusáček Rampichová, Věra Hedvičáková, Pavol Alexy, Radek Přikryl, Veronika Melčová. Optimizing printability and mechanical properties of poly(3-hydroxybutyrate) biocomposite blends and their biological response to Saos-2 cells. International Journal of Bioprinting 2025, 11(1), 400–417. https://doi.org/10.36922/ijb.5175
Spolupracující subjekt:
Ústav chemie materiálů, Fakulta Chemická, VUT Brno Brno, ČR;
Fakulta chemickej a potravinárskej technológie Slovenskej technickej univerzity v Bratislave, SR
Nanovlákenný hybridní nosič z organosilanů podporující buněčnou adhezi a proliferaci
V této studii byl testován organosilanový nanovlákenný (NFs) materiál vyrobený z N,N´-bis(3-(triethoxysilyl)propyl)oxamid (BTPO) metodou elektrostatického zvlákňování. BTPO NFs vykazoval v porovnání s polykaprolaktonovým a tetraethoxysilanovými NFs nosiči dobrou proteinovou adsorpci i buněčnou proliferaci a zanedbatelnou cytotoxicitu. BTPO NFs je proto slibným materiálem pro využití v medicíně. Jednoduchý postup syntézy BTPO zamezuje komplikacím, které se mohou objevit u vícesložkových materiálů.
Buněčná proliferace a distribuce buněk na nanovlákenných materiálech zobrazena pomocí konfokální mikroskopie. Buněčná jádra byla barvena propidium jodidem (červeně) a membránové struktury byly barevny DiOC6(3) (zeleně) 1. a 7. den experimentu. Aktinová mikrofilamenta byla barvena phalloidinem (červeně) a jádra buněk byla barvena Hoechstem (modře) 14. den experimentu. Velikost měrky je 100 μm. Zkratky: N,N´-bis(3-(triethoxysilyl)propyl)oxamid (BTPO), tetraethoxysilan (TEOS), polykaprolakton (PCL).
Publikace:
Hobbs C., Kulhankova J., Holubová B., Mahun A., Kobera L., Erben J., Hedvicakova V., Hauzerova S., Rysova M., Makova V., Hybrid organosilane nanofibre scaffold formation supporting cell adhesion and growth, Journal of Materials Science. 2024; 59:19612–19627, https://doi.org/10.1007/s10853-024-10324-0
Postupné uvolňování alendronátu pro léčbu nadkriticky velkých kostních defektů u osteoporotických a kontrolních potkanů
Osteoporóza je rozšířené závažné onemocnění, jehož standardní léčba spočívá v systematickém podávání bisfosfonátů, nejčastěji alendronátem (ALN). Systematická léčba je ale spojena s nežádoucími vedlejšími účinky. V této studii jsme vyvinuli nosič z polykaprolaktonu/nanohydroxyapatitu s uzavřeným ALN, pro lokální uvolnění léčiva přímo v místě poškození kosti. ALN se z nosiče postupně uvolňoval po více než 22 dní. In vivo studie prokázala účinek uvolněného ALN, který podporoval novotvorbu kosti v okolí implantovaného nosiče.
Mikro-CT kostních defektů po 6týdenní regeneraci. Analýza mikro-CT defektů ukázala, že v okolí nosičů obsahujících ALN (PCL/HA/ALN) odcházelo k tvorbě denzní kostní hmoty v porovnání s nosičem bez ALN (PCL/HA) a kontrolním prázdným defektem (empty) a to jak u zvířat s navozenou osteoporózou (OP), tak u kontrolních zvířat (C). Na výsledky nemělo vliv systémové podávání ALN (+ALN) v porovnání se zvířaty bez celkové léčby (-ALN).
Publikace:
Hedvičáková, V., Žižková, R., Buzgo, M., Vištejnová, L., Klein, P., Hovořáková, M., Bartoš, M., Steklíková, K., Luňáčková, J., Šebová, E., Paurová, I., Rysová, M., Filová, E., & Rampichová, M. (2023). The Gradual Release of Alendronate for the Treatment of Critical Bone Defects in Osteoporotic and Control Rats. International journal of nanomedicine, 18, 541–560. https://doi.org/10.2147/IJN.S386784
Vliv metody izolace osteoblastů z dospělých potkanů na osteoklastogenezi v ko-kultuře
Buněčné ko-kultury představují budoucnost in vitro studií důležitých pro testování tkáňových náhrad a výzkum nemocí. Při vývoji ko-kultury osteoblastů a osteoklastů byl zkoumán vliv metody izolace osteoblastů na tvorbu osteoklastů. Bylo zjištěno, že metoda izolace explantátovou kulturou indukuje vznik vyššího počtu osteoklastů, s větší rozlohou než metoda explantátové kultury s enzymatickým ošetřením.
Potkaní osteoklasty v kokultuře s osteoblasty izolované různými metodami. Počet, rozloha a počet jader potkaních osteoklastů (rOCs) v ko-kultuře s osteoblasty izolovanými explantátovou kulturou s enzymatickým ošetřením nebo explantátovou kulturou.
Histochemické barvení ko-kultury osteoklastů a osteoblastů izolovaných různými metodami. Histochemické barvení ko-kultury osteoklastů a osteoblastů izolovaných explantátovou kulturou s enzymatickým ošetřením nebo explantátovou kulturou. Bílé šipky ukazují vytvořené osteoklasty. Zvětšení 40×, měřítko 500 µm; 100×, měřítko 200 µm.
Publikace:
Žižková, R., Hedvičáková, V., Blahnová Hefka, V., Sovková, V., Rampichová, M., Filová, E.: (2022) The Effect of Osteoblast Isolation Methods from Adult Rats on Osteoclastogenesis in Co-Cultures. International Journal of Molecular Sciences. 23(14):7875.
Použití keramického/biopolymerního hybridního implantátu obohaceného o hyperstabilní fibroblastový růstový faktor 2 pro mezitělovou fúzi bederní páteře – studie na modelu prasete
Stabilizovaný fibroblastový růstový faktor-2 (FGF2-STAB®), s funkčním poločasem rozpadu více než 20 dní při 37 °C, byl použit v kombinaci s bioresorbovatelným nosičem pro mezitělovou fúzi bederní páteře na modelu prasete. Kvalita fúze páteře ošetřené nosičem obsahujícím anorganický hydroxyapatit, trikalciumfosfát s organickým kolagenem, oxidovanou celulózou a FGF2-STAB®, vykazovala po 16 týdnech lepší kvalitu v porovnání s kontrolním defektem ošetřeným autologním graftem.
Ověření biokompatibility keramického nosiče in vitro. Ověření biokompatibility keramického nosiče in vitro: proliferace hMSC byla měřena jako kvantifikace buněčné DNA (A). Hladina statistické významnosti mezi skupinami je vyznačena nad sloupci (p < 0,05). Buněčná adheze a distribuce na nosiči byla vizualizována pomocí konfokální mikroskopie. Nosič z bifazického kalcium fosfátu (BCP) 1. den po nasazení buněk na nosič (B), bioresorbovatelný hybridní nosič (BHI) v 1. den (C), BCP nosič 14. den (D), BHI nosič 14. den (E). Buněčná jádra byla obarvena propidium jodidem (červená barva), vnitrobuněčné membrány obarveny pomocí DiOC6(3) (zelená barva), měrka 200 µm. Zkratky: hMSC, humánní mesenchymální kmenové buňky; BCP, čistý keramický nosič; BHI, keramický nosič s biopolymery a FGF2-STAB®.
Publikace:
Krticka, M., Planka, L., Vojtová, L., Nekuda, V., Šťastný, P., Sedláček, R., Brinek, A., Kavková, M., Gopfert, E., Hedvičáková, V., Rampichová, M., Křen, L., Lišková, K.,Ira, D., Dorazilová, J., Suchý, T., Zikmund, T., Kaiser, J., Starý, D., Faldyna, M., Trunec, M.: (2021) Lumbar Interbody Fusion Conducted on a Porcine Model with a Bioresorbable Ceramic/Biopolymer Hybrid Implant Enriched with Hyperstable Fibroblast Growth Factor 2. Biomedicines. 9(7): 733. doi: 10.3390/biomedicines9070733. PMID: 34202232; PMCID: PMC8301420.
Projekty
2024–2027
Personalizovaná rekonstrukce kosti s rychlou osseointegrací a antibakteriální titanové implantáty po chirurgické resekci osteosarkomu
Oddělení tkáňového inženýrstvíUllrich M. M.Pulipaka B.Yin J.Hlinková J.Zhang F.Chan M. W.O'Brien F. J.Dervan A.Dziemidowicz K.
2025
Mol Pharm . 2025 Jun 2;22(6):2905-2916. doi: 10.1021/acs.molpharmaceut.4c01270. Epub 2025 May 16.
Oddělení tkáňového inženýrstvíNeuhoferova E.Kindermann M.Buzgo M.Vocetková K.Panek D. Cigler P.Benson V.
2025
J Mater Chem B . 2025 Jan 15;13(3):1037-1051. doi: 10.1039/d4tb01547a.
Oddělení tkáňového inženýrství Leal F.Nirwan V.Goncalves A.M.Panitschewski N.Filová E.Fahmi A.Costa P.F.
2023
International Journal of Polymeric Materials and Polymeric Biomaterials. IN PRESS.